0.25%胰蛋白酶消化液(溶于PBS,不含EDTA,含酚红)

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0.25%胰蛋白酶消化液(溶于 PBS,不含 EDTA,含酚红)

HRX0033

100mL

-20℃

88.00

 

产品描述

 

      胰蛋白酶(Trypsin)简称胰酶,是一种丝氨酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端 切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰蛋白酶消化液,用于水解细胞 间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在 37℃ pH 8.0 条件下消化能力最强。常用胰酶工作浓度 为 0.25%。

      本产品含 0.25%胰蛋白酶,含酚红指示剂,不含 EDTA,溶剂为 PBS 缓冲液,经 0.1 μm 过滤除菌。

 

操作步骤

 

贴壁细胞的消化
1、吸去培养液,用无菌的PBS、D-Hank’s 液或无血清培养液洗涤细胞去除残余的血清。

2、加入少量胰酶细胞消化液(含酚红),略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。

3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来;此时吸除胰酶细胞消化液;加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
4、如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
5、如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

 

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存。建议分装后于-20℃冻存,避免反复冻融!

 

注意事项

 

1)在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。

2)胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。

3)  本产品含磷酸盐体系,在低温冷冻保存后溶液呈黄色。这是由于温度导致溶液 pH 值发生变化,在正 常解冻复温后即恢复为红色,不影响产品使用性能。可能会因某些原因(例如采用干冰运输)导致溶 液 pH 略微下降,从而使溶液颜色由红色变成浅黄色。该种浅黄色的溶液依然可以使用,或者也可采 用无菌的 2M NaOH 溶液对 pH 进行微调后使用。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5)本产品仅作科研用途!

 

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