价格:150
货号HRbio™ Taq DNA Polymerase DNA聚合酶
产品详情
产品详情
产品信息
|
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
HRbio™ Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 |
HRF0011 |
1000 U |
150.00 |
|
HRbio™ Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 |
HRF0012 |
5×1000 U |
700.00 |
产品描述
HRbio™ Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化的，分子量为94 kD。Taq DNA Polymerase具有5’→3’DNA聚合酶活性和5’→3’外切核酸酶活性，无3’→5’外切酶活性。在PCR反应中，Taq DNA Polymerase 延伸速度为1-2 kb/分钟，产物3’端带A，可直接用于T/A载体克隆。
产品组分
|
编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
|
|
HRF0011（1000 U） |
HRF0012（5×1000 U） |
||
|
HRF001-A |
10×Taq Buffer (with Mg2+) |
2×1 mL |
10×1 mL |
|
HRF001-B |
HRbio™ Taq DNA Polymerase (5U/μL) |
200 μL |
5×200 μL |
产品应用
常用于DNA片段的PCR扩增、基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等，产物可直接用于T/A载体的克隆。
活性定义
1 单位(U) Taq DNA Polymerase 活性定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物，将10nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制
1.SDS-PAGE检测纯度大于99%，经检测无外源核酸酶活性；
2.PCR方法检测无宿主残留DNA，能有效的扩增人基因组中的单拷贝基因
3.室温存放一周，无明显活性改变
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！
建议PCR反应体系（以50μL反应体系为例，冰上配制）
|
组分 |
体积（μL） |
|
ddH2O |
to 50 |
|
10×Taq Buffer (with Mg2+) |
5 |
|
dNTP Mix (10 mM each) |
1 μL |
|
模板DNA |
＜0.5 μg |
|
引物1(10 μM) |
1 μL |
|
引物2(10 μM) |
1 μL |
|
HRbio™ Taq DNA Polymerase (5 U/μL) |
0.5-1 μL |
【注】：
1）聚合酶添加：室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性，为了防止非特异性扩增，建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
2）不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：
|
模板种类 |
扩增片段 |
|
基因组DNA |
50 ng～100 ng |
|
质粒DNA |
10 pg～20 ng |
|
cDNA |
1~5 μL（不超过反应体系的1/10） |
PCR扩增程序
|
循环步骤 |
温度（C） |
时间 |
循环数 |
|
预变性 |
94 |
2-5min |
1 |
|
变性 |
94 |
30 sec |
30 |
|
退火 |
50-60 |
30 sec |
|
|
延伸 |
72 |
60 sec/1-2kb |
|
|
终延伸 |
72 |
5-10 min |
1 |
【注】：
1）预变性温度和时间：推荐使用94℃。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。
2）退火温度和时间：推荐使用60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。