• 说明书丨HRF0454-Exonuclease I核酸外切酶 I.pdf

产品信息

产品描述

本产品Exonuclease I (E. coli) 是单链特异性核酸外切酶，沿 3'-5' 方向降解单链 DNA，释放 5'- 脱氧核糖核苷酸。Exo I 对单链有很强的特异性，不会降解双链 DNA 和 RNA。此外，也无法降解由磷酰基团或乙酰基团封闭了 3'-OH 末端的 DNA 单链。本产品是把 Exo I 基因 (E.coli) 在大肠杆菌中进行重组表达后，经多次纯化分离而得到的。

应用方向

1. 从 PCR 产物中去除引物和寡核苷酸：Exo I 可去除 PCR 反应中未用完的引物以及扩增产生的多余的单链 DNA。
2. 去除核酸混合物中的 ssDNA：Exo I 可特异性地消化反应液中的ssDNA，而不会消化 dsDNA 和 RNA。
3. ssDNA 检测：Exo I 可用于检测存在游离 3' 羟基的 ssDNA。

产品组成

反应条件和酶活定义

37℃温育 15~30 min。

1 活性单位 (U) 是指以单链 DNA 为底物 ，37℃、1× Exo I 缓冲液条件下，30 min 内释放 10 nmol 酸溶性核苷酸所需的酶量。。

使用方法

1、推荐反应体系：

（1）PCR 反应产物中去除引物或其他单链残留：

注：配合虾碱性磷酸酶（SAP）用来去除残存的单核苷酸（dNTPs），之后不需要对 PCR 产物进行纯化，即可以进行测序反应。

（2）单链 DNA 去除

注：其中：DNA mixture 中的单链 DNA 不超过 1 μg。

2、37℃孵育 15-30 min；

3、80℃温育20min；

注意事项

1.Exo I 可兼容绝大多数 PCR 体系，可直接在 PCR 产物中添加。纯化后的 PCR 产物可直接用于测序，但不推荐直接用于克隆。

2.Exo I 用于单独去除 ssDNA 的实验，推荐搭配 10× Exo I Buffer使用。

3.Exo I 不能切割双链 DNA，因此含有二级结构的单链 DNA 需要变性后才能完全消化。

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

5.本产品仅作科研用途！

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期12个月。