价格:998
货号HRbio™ siRNA Transfection Reagent siRNA 转染试剂
产品详情
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产品信息
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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HRbio™ siRNA Transfection Reagent HRbio™ siRNA 转染试剂 |
HRX1431 |
0.75 mL |
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HRX1432 |
1.5 mL |
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HRX1433 |
5×1.5mL |
产品说明
siRNA转染试剂是一款新型、性能稳定的siRNA专用转染试剂，它具有较强的压缩RNA的能力，能够把RNA高效率、迅速地转染到真核细胞之中，而不被核酸酶降解。与其他转染试剂相比，具有毒性低、稳定性好、耐血清能力强、转染简单易行、重复性好等优点。
产品组分
| 产品组分 | HRX1431 | HRX1432 | HRX1433 |
| siRNA plus | 0.75mL | 1.5mL | 5×1.5mL |
| Booster | 0.75mL | 1.5mL | 5×1.5mL |
应用范围：
siRNA转染试剂可适用于众多原代培养和转化细胞株的siRNA转染。沉默效率高且性能稳定，在有无血清存在的细胞培养基中均能获得非常理想的基因沉默效果。
操作步骤：
1、细胞种板： 参考列表推荐密度接种细胞，使转染时孔板中细胞密度达到60%~70%；
2、转染前准备：转染试剂siRNA Plus 与增强剂Booster 须提前恢复至室温，涡旋瞬离， siRNA 浓度为0.1 μg/μL 或者10 μM；
3、 细胞转染：以12 孔板为例，配制50 μL 转染复合物，务必按照下图加样顺序加样 。
①.吸取5μL siRNA溶液与5μL Booster溶液充分吹打混匀；
②.吸取5μL 转染试剂siRNA Plus 溶液与上述①siRNA与Booster混合溶液中，并充分吹打混匀，室温孵育5min；
③.孵育结束后，向上述②混合溶液中加入35μL 转染稀释液（无菌PBS或Opti-MEM或细胞培养基），充分吹打混匀，随后将50μL转染复合物加入到12孔板的一个孔中，摇动混匀培养板中的液体。
图1.
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siRNA溶液（10μM或0.1μg/μL） |
Booster |
转染试剂siRNA Plus |
转染稀释液 （PBS/OptiMEM/细胞培养液） |
siRNA转染复 合物总体积 |
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siRNA转染复合物（1μM或10ng/μL） |
5μL |
5μL |
5μL |
35μL |
50μL |
注意：如需配制其他体积siRNA转染复合物，在siRNA浓度不变的情况下，等比例调节各组分体积即可，注意最小配制体积30μL。建议siRNA浓度为0.1μg/μL或者10μM，以便取得最佳沉默效果。
4、 细胞培养：24h检测细胞后检测基因沉默水平。
5、 其他孔板类型按照下表配制、添加siRNA转染复合物
| 接种细胞数 | 培养基体积 | 每孔siRNA转染复合物加入体积 | 最小配制孔数 | |
| 96孔板 | 0.8-1.2×104 | 100 μL | 5 μL | 6 |
| 48孔板 | 3.5-5.0×104 | 250 μL | 10 μL | 3 |
| 24孔板 | 0.8-1.0×105 | 500 μL | 25 μL | 2 |
| 12孔板 | 1.0-2.0×105 | 1.0 mL | 50 μL | 1 |
| 6孔板 | 2.0-4.0×105 | 2.0 mL | 100 μL | 1 |
注意：按上表加入siRNA转染复合液，各孔siRNA终浓度为所配制转染复合液siRNA浓度的1/20。
运输与保存：
常温，2-8℃保存一年。
注意事项：
1.特别注意，务必按照图1.加样顺序配制转染复合物，切勿将siRNA先与转染稀释液或siRNA Plus转染试剂混合。
2.对于本转染试剂，需恢复至室温，涡旋瞬离后使用。建议配制转染复合物最小体积为30μL，以免吸取转染试剂量过少，影响复合效果与转染效率。
3.加入配制完的转染复合物后，无需换液，24h后可进行siRNA检测。如需48h检测蛋白表达，可在加完转染复合物后24h更换细胞培养液，48h进行蛋白表达检测。可选：如在加完转染复合物12h观察到有细胞生长缓慢，可在12h进行换液。
4.本品可转染miRNA、ASO，只需将核酸浓度调整至10μM或0.1μg/μL即可。
5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
6.本产品仅作科研用途！