价格:45
货号2×Flash Taq PCR Mix
产品详情
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产品信息
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
| 2×Flash Taq PCR Mix |
HRF0008 |
1 mL |
| 2×Flash Taq PCR Mix |
HRF0009 |
5×1 mL |
| 2×Flash Taq PCR Mix |
HRF0010 |
50×1 mL |
产品描述
本产品包含突变的高速Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×，扩增速度可达到10s/kb。适用于高速PCR反应，1kb以内的扩增速度最快可达1s/kb，可极大的减少PCR扩增的时间。本产品是预混液的形式提供，在进行PCR扩增时，只需要加入引物和模板即可，并加入去离子水补足体积，无需加入其他扩增因子。
本产品比普通的PCR mix的扩增效率高，稳定性强，8kb以内的基因组模板、12kb以内的质粒和 λ DNA均可用本产品进行扩增。mix中加入了多种保护剂，反复冻融后，酶活性依然能保持稳定。本产品的PCR产物在3'端带A尾。
使用本产品前，请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。
产品特点
1、超快的扩增速度：延伸速度可以达到5-10sec/kb，最快30min内完成PCR实验。
2、相较于普通taq酶，本产品的保真度是其2-5倍以上。
3、对于一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高模板，本产品依然能保持较高的产量。
质量控制
经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余 DNA ：能有效地扩增人基因中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。
适用范围
基因检测:本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测，半定量PCR实验和微量DNA的检测。
DNA扩增和一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高(>60%)，有二级结构等的扩增:DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定等。PCR产物带A，纯化后可直接用T/A载体克隆。
反应举例
1、反应体系（25 μL）
| 组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
| 2×Flash Taq PCR Mix | 12.5μL | 1 × |
| 正向引物 | 0.5μL | 0.2 μM |
| 反向引物 | 0.5μL | 0.2 μM |
| 模板DNA | 根据要求添加 | |
| ddH2O | 用水补足到25μL |
2、反应体系（50μL）
| 组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
| 2×Flash Taq PCR Mix | 25μL | 1 × |
| 正向引物 | 1μL | 0.2 μM |
| 反向引物 | 1μL | 0.2 μM |
| 模板DNA | 根据要求添加 | |
| ddH2O | 用水补足到50μL |
参考模板用量（50 μl反应体系）：
质粒：0.1-10 ng；细菌基因组：10-100 ng；人类基因组：50-150 ng；cDNA：1-5 μL
扩增程序
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循环步骤 |
温度（℃） |
时间 |
循环数 |
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预变性 |
94 |
2-3 min |
1 |
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变性 |
94 |
10 sec |
25-30循环 |
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退火 |
55 |
10-15 sec |
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延伸 |
72 |
10 sec/kb |
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终延伸 |
72 |
1-5 min |
1 |
结果检测
反应结束后取5μL 反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。
注意事项
1）2×Flash Taq PCR Mix扩增速度极快，短片段或者简单模板如质粒模板可尝试5sec/kb，延伸速度并可以减少PCR循环数就可以达到理想的结果。较长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低可以采用15-20 sec/kb延伸速度或者采用较多循环数
2）2×Flash Taq PCR Mix产量低时可尝试采用较长的延伸时间(如20 sec/kb）和循环数（如35个），以达到提高PCR产物的目的。
3）对于GC含量很高的模板，短片段预变性和变性温度可以提高到98℃和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA损伤不应该提高变性温度，应该适当延长预变性时间到5分钟，变性时间可以适当提高5-10秒。
4）如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%，按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7 M。并采用降落PCR（Touchdown PCR）。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
6）本产品仅作科研用途！
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。