产品信息

产品描述

 Western Bloting 实验中，在完成了一抗、二抗结合以及后续的化学发光检测等一系列步骤后，可能需要对相同样品中其他蛋白（不同一抗结合）进行检测，或者在相同蛋白（相同一抗）的第一次检测结果不佳从而需要优化检测体系的情况，为了节省工作时间，节省样本使用量，以及消除重新上样可能引起的误差，可通过使用蛋白印迹膜再生液（Stripping buffer）来实现。

 本增强型蛋白印迹膜再生液能够安全高效地从硝酸纤维素膜和PVDF膜上去除一抗和二抗，且不会破坏抗原，从而再次检测化学发光的免疫印迹。能够帮助客户节省工作时间、样本使用量，以及消除重新上样可能引起的误差。。

产品选择

运输与保存方法

室温运输。4℃保存，一年有效。

使用方法

1）完成WB化学发光检测后，用1×TBS-T洗膜3次，10min/次。

2）将膜充分浸泡于适量的膜再生液中（至少完全覆盖膜），摇床震荡室温孵育20-30 min，如洗脱效果不佳或者蛋白表达量较高，可延长洗膜时间至30-60min或者更长。

3）用镊子取出膜，用1×TBS-T缓冲液快速淋洗膜一次，之后洗膜5-10min。

4）按照下述方法检测

A.完整去除二抗的测试：将膜进行发光检测，如果5分钟内未检测到型号，则二抗已经成功从抗原或者一抗中去除。

B.完整去除一抗的检测：用封闭液封闭膜，用HRP标记的二抗孵育膜，然后用洗涤缓冲液洗涤，进行发光检测，如果5分钟内没有检测到信号，则已经成功将一抗从抗原中除去。

5）此时膜上结合的抗体已被去除，重新封闭，进行下一轮抗体孵育。

注意事项

1）本品从低温取出后会出现SDS沉淀，建议温水浴溶解后使用。

2）本品仅适合WB化学发光法检测膜的重复利用；对于生色法底物检测的膜不适合；另外不推荐用于BSA封闭的印迹膜；

3）建议优先检测表达量较低的目的蛋白，用再生液处理后检测表达量高的蛋白；

4）本品重复利用几次后，可能引起蛋白信号变弱。所以建议重复使用次数不要超过5次，以确保更好的WB检测效果。

5）本品适用于NC膜和PVDF膜，推荐用于PVDF膜，效果更佳；

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7) 本产品仅作科研用途!