• 说明书丨HRF0245-Avian (Sex) Identification Kit鹦鹉（性别）鉴定试剂盒.pdf

产品信息

产品描述

本试剂盒采用专门的裂解液快速裂解羽根毛囊，释放出的DNA无需纯化便可以作为模板，采用经典鸟类CHD1基因特异性引物，用扩增性能强的2× Avian Direct PCR Mix直接进行PCR扩增。通过琼脂糖凝胶电泳条带数量与片段大小，可快速、精准判定鸟类雌雄性别：雄性（ZZ）仅扩增出Z基因单一条带；雌性（ZW）同时扩增出Z、W两条特异性条带。适用于非平胸鸟类（包括鹦鹉，鸽子等）的批量、快速、无创性别鉴定。

适用范围

适用于鹦鹉、家鸽、各类笼养鸣禽、观赏雀类、鸠鸽类等绝大多数人工繁育非平胸鸟类批量、快速、无创性别鉴定。

产品组分

a)Buffer V1 为裂解缓冲液，包含了强力蛋白变性剂，请戴手套操作。

b)Buffer V2 为终止缓冲液，用以终止Buffer V1的裂解功能。

c)2× Avian Direct PCR Mix：包含Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl²⁺、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂、稳定剂和电泳指示染料等。

运输方法

冰袋运输，-20℃保存。

保存方法

组分A：2-8℃保存，有效期1年。使长时间多次使用，请分装冻存，避免交叉污染。

组分B、C、D、E：-20℃保存，避免反复冻融。有效期1年。

操作方法

1. 取0.5-1 cm带活性毛囊的白色羽根（纯绒毛、硬质羽管无扩增信号），剪碎处理，放入0.2 mL PCR薄壁管。取样多少可以根据鸟类的羽根大小进行调整，适配小体积裂解体系，提升扩增成功率；

2. 加入10 μl Buffer V1，将剪碎的羽根浸没在裂解液内；

3. 98°C裂解15 min（建议PCR仪上操作），根据情况裂解时间可以在10 min-45 min内调整；

4. 取出PCR管放冰上，加入10 μl Buffer V2，轻弹混匀或者吹打混匀，即可直接用做PCR模板或置于4°C或-20°C短时保存；

5. PCR反应鉴定。

PCR反应鉴定——PCR反应体系

PCR反应鉴定—PCR反应条件

【注】：

a）如果扩增条带较弱，可以适当增加或者减少模板加入量，裂解混合物模板一般可以在3 μl-8 μl内调节。

b）如果非特异扩增较多，可调整退火温度，或者适当增减模板用量。

c）溶液使用完毕后，应盖紧盖子，以免pH改变影响产品性能。

物种特异性条带判读标准

1.鹦鹉类（玄凤、虎皮、牡丹、金刚、太阳等所有宠物鹦鹉），雄性（公鸟）：单一条带 640–650 bp；雌性（母鸟）：双条带 630–640 bp + 410–415 bp。
2.灰鸽/家鸽/信鸽，雄性（公鸽）：单一条带 460 bp；雌性（母鸽）：双条带 460 bp + 320 bp。
3.针对金丝雀、文鸟、珍珠鸟、八哥、画眉、百灵等多数笼养鸣禽及小型观赏鸟类，因物种基因差异，片段大小无统一固定数值，遵循试剂盒核心通用判读逻辑即可：雄性仅单一条带，雌性双条带，条带清晰、无杂带干扰即为有效结果。
4.有效实验前提：阳性条带正常、阴性无条带，实验无污染。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2. 本产品仅作科研用途！